분열효모 Schizosaccharomyces pombe로부터 분리된 Glutaredoxin Ⅱ유전자의 성질 규명과 Glutaredoxin Ⅰ과의 비교분석

Glutaredoxin (thioltransgerase)은 작고 열에 안정한 multi-functional glutathione-dependent disulfide oxidoreductase이다. 이전에 우리는 분열효모 Schizosaccharomyces pombe로부터 첫 번째 grx 유전자를 분리하여 그 기능과 조절을 규명하였다. 본 연구에서는 분열효모로부터 두 번째 grx 유전자를 분리하였는데, 이 유전자는 1642-bp의 necleotide를 포함하고 있으며, 110개의 아미노산을 갖는 분자량이 12.24 kDa의 polypeptide를 encoding한다. 또한 4개의 exon과 3개의 intron을 포함하고 있으며, 775-bp의 upstream region과 166-bp의 downstream region을 갖는다. Grx Ⅱ유전자를 E. coli-yeast shuttle vector인 pRS316과 YEp357R에 각각 cloning하여 pKL G2, pKLY G2라 명명하였다. 두 개의 recombinant plasmid는 S. pombe cell에서 발현되어 grx activity를 나타내었으며, 여러 중금속과 menadoine, H₂O₂ 등에 의해 activity가 증가되었다. 또한 grx Ⅰ과 Ⅱ의 DNA sequence와 아미노산 sequence를 비교한 결과 상당히 높은 유사성을 보여주고 있다.