기내배양에 의한 차나무 대량증식기술개발

Development of Mass Propagation Techniques of Camellia sinensis through In vitro Culture

재래종 차나무 종자를 무균상태에서 발아시켜 생장한 차나무의 액아가 있는 작은 줄기를 재료로 대량증식 방법을 실험하였다. 6가지 배지 중, MS와 WPM 배지에서 좋은 줄기 생장을 나타냈다. 대량증식 실험은 MS, WPM 배지에 BA, 2iP 및 TDZ를 6단계별로 처리하여 배양한 결과 BA 5 μM를 첨가한 MS배지와WPM배지에서 좋은 생장을 나타내어 MS배지와 WPM 배지에 BA 5 μM을 고정시키고 GA3를 농도별로 처리한 결과 GA3 5 μM을 첨가한 WPM배지에서 64개의 가장 많은 수의 줄기를 얻었다. 차나무의 발근실험에서는 IBA 30 μM를 첨가한 MS배지에서 뿌리 발생률이 높았으며 줄기생장도 좋았으나 그 이상의 농도에서는 뿌리 생장에 비해 줄기 성장이 좋지 않았다. 뿌리가 발생한 줄기를 인공토양에 이식하였으며 이식한 3～4주후부터 뿌리 활착이 양호하게 나타났다. 같은 모수에서 대량 증식된 개체간의 유전자 변이가 발생하는 지를 밝히기 위해 PCR 실험을 실시하였다. 그 결과 전체 20개의 primer에 대해 같은 모수에서 발생한 개체 간에는 유전적 변이가 나타나지 않았다. 이러한 결과로 볼 때 유전적으로 동일한 영양체의 대량생산을 위하여 조직배양법은 매우 적절한 방법임을 밝혀냈다.

An optimal protocol for mass propagation of Korean tea plants was studied by tissue culture methods. Korean tea seedlings which were cultured in vitro were used for mass propagation. In order to induce the germination and growth of the tea plants, 6 different media were used. Out of 6 levels of BA, 2iP and TDZ with the media, MS and WPM with 5 μM BA showed the best result among them. A number of multishoots were propagated in the MS and WPM with BA and GA3, WPM with 5 μM BA and 5 μM GA3 was represented much number of shoots as 64 shoots. The multishoots rooted with high frequency in MS with IBA 30 μM, but the shoot growth began to decrease in the media with more than concentration of IBA 30 μM. The rooting shoots were planted in the culture*Corresponding author(E-mail: ygpark@knu.ac.kr, Tel: 053-950-5747, Fax:053-950-6708) soil (perlite : vermiculite=1 : 1 ) and the growth and rooting of the plants were proved to be good result after 3 or 4 weeks from planted. In order to identify genetic variation, we observed PCR band of the plants. The PCR band patterns were not difference within individuals from mass propagated shoots of same mother plants. This method appears to be an optimal technique for mass propagating shoots of the tea plants.