인간 각막세포에서 국소 면역억제 인자 Indoleamine 2,3-dioxygenase의 발현

목적 : 인간 각막세포에서 indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO)의 발현 양상을 확인하고 이의 국소 면역억제 인자로써의 기능을 평가해 보고자 하였다. 대상과 방법 : 초대배양된 인간 각막세포에서 IDO의 발현 양상을 RT-PCR과 Western blot을 통해 확인하였다. IDO의 발현과 면역억제와의 관련성을 알아보기 위하여 인간 각막세포 조정배지에서 면역세포를 배양한 후 세포의 증식을 MTT assay를 통해 확인하였으며 IFN-γ 처리에 의한 IDO의 면역세포 사멸유도 효과를 ELISA 방법을 통해 확인하였다. 결과 : 세 종류의 인간 각막세포(각막 상피세포, 간질세포, 내피세포) 중 각막 간질세포에서 IDO의 mRNA 및 단백질이 발현되는 것을 확인할 수 있었다. 각막 간질세포 조정배지에서 배양한 면역세포는 그 증식이 감소하는 양상을 나타내었으며 IFN-γ 처리에 따라 농도의존적으로 IDO의 면역세포 사멸유도 효과가 증가됨을 확인할 수 있었다. 결론 : 인간 각막 간질세포는 IDO의 발현에 의해 면역관용이 증가될 것으로 생각되며 이후 이를 이용하여 각막 이식수술시 면역거부 반응을 감소시킬 수 있는 국소면역억제 인자로서의 적용 가능성이 기대된다.<한안지 48(8):1126-1133, 2007>

Purpose: To identify the localization of indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) in human corneal cells and to evaluate its ability to act as a local immunosuppressive factor. Methods: The expression profile of IDO was obtained with RT-PCR and Western blot of in a primary culture of human corneal cells (fibroblasts, epithelial cells and endothelial cells). In order to investigate the immunosuppressive function of IDO, immune cells were cultured in a human corneal cell-conditioned medium, and their prolifleration was identified by the MTT assay. Moreover, apoptotic effects of IDO in immune cells treated with IFN-γ were also investigated with apoptosis ELISA. Results: Among the three different types of human corneal cells analyzed, mRNA and protein expression of IDO was observed only in human corneal fibroblasts. Immune cells cultured in a human corneal fibroblast-conditioned medium showed inhibited proliferation. Moreover, IFN-γ-induced expression of IDO significantly enhanced apoptotic ability in a dose-depandant manner. Conclusions: Our results suggest that human corneal fibroblasts are relatively immuno-resistant and that expression of IDO may be one of the factors involved in the immune tolerance observed in corneal grafts. J Korean Ophthalmol Soc 48(8):1126-1133, 2007