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학술저널

뇌허혈손상모델에서 HPLC를 이용한 Agmatine의 정량

Quantitative Analysis of Agmatine by HPLC in Ischemic Brain

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아그마틴 (agmatine)은 포유동물의 조직에서 넓게 분포된 물질로, 뇌허혈시에 신경보호작용을 나타낸다. 본 연구에서는 마우스 중간대뇌동맥결찰술(mouse MCAO) 모델에서 아그마틴의 신경보호작용과 변화량을 비교, 관찰하고자 하였다. 뇌허 혈 손상시 아그마틴의 영향을 조사 하기 위해, 실험대조군(MCAO 후 saline 투여)과 중간대뇌동맥 결찰술을 시행한 후 아 그마틴을 투여 (co-injected group)하고, 0, 2, 3, 4, 7, 24시간 후 실험동물을 실험에 사용하였다. 각 실험군 당 3마리 이상의 동물을 사용하였고, 아그마틴의 투여량은 일회 100 mg/kg을 복강으로 투여하였다. 실험대조군에는 중간대뇌동맥결찰술 후 생리식염수를 투여한 것을 TTC염색을 하여 확인한 결과 대뇌의 손상을 입은 것을 확인할 수 있었다. 허혈 손상시 아그마틴의 투여로 뇌경색 크기가 현저하게 줄어 드는 것을 관찰할 수 있었다. 따라서 투여한 아그마틴에 의해 생체 내에서 아그마틴의 양의 변화를 살펴보기 위하여 HPLC를 사용하여 정량한 결과, 실험대조군의 경우 아그마틴의 양은 혈관 폐색기간동안 계속해서 양이 증가하였다가 재관류가 시작되면서 양이 감소하기 시작하여 재관류 2시간째에는 정상 수준으로 감소하나, 재관류 24시간 후에는 다시 아그마틴의 양이 증가하였다. 반면, 아그마틴 투여군에서는 다시 증가하지 않았다. 이 결과는 뇌허혈 손상시 아그마틴의 신경보호작용과 연관이 있을 것으로 사료되며, 주변부에서의 아그마틴변화량이 줄 무늬체와 대뇌겉질에서보다 유의하게 높게 나타났다 (⁄1 h after 2 hours of MCAO).

Agmatine, a widely distributed molecule in mammalian tissues, shows neuroprotective effects in brain ischemia. We describe the neuroprotective effects of agmatine in the mouse MCAO model and the quantitative change of agmatine in ischemic injury. Brain ischemic injured mice were injected with agmatine (100 mg/kg of mouse, IP). Agmatine significantly reduced the infarct area after MCAO. Despite the similar patterns of agmatine change observed in control or agmatine injected animals, the agmatine levels of the penumbra were significantly higher than those of the striatum and the cerebral cortex during the early period (⁄1 hour after 2 hours of MCA occlusion). This suggests that the early period, during which agmatine levels increase in the brain, is the crucial period in terms of neuroprotective effect during ischemia.

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