배쪽신경관 형성에 있어 Gli3의 필수적인 역할은 Shh-/- 생쥐나 Shh-/-;Gli3-/- 생쥐 등의 연구를 통해 잘 알려져 있다. 그러나 Gli3가 등쪽신경관에 많이 발현되고 있음에도 불구하고 그 역할이 아직 명확하지 않다. 본 연구에서는 등쪽신경관에서 Gli3의 역할을 구명하기 위하여 Gli3-/-생쥐의 등쪽신경관 발생을 관찰하였다. Phosphohistone 3에 대한 면역조직화학법과 BrdU 실험을 통하여 세포분열을 조사하였을 때 Gli3-/- 생쥐의 등쪽신경관에서 세포분열이 정상 생쥐에 비해서 증가하였다. 세포주기를 벗어난, 신경세포와 dI3 사이신경세포에서 각각 발현되는 HuC/D와 Isl1은 Gli3-/- 생쥐에서 정상 생쥐에 비해서 그 발현이 지연되었다. 전구세포에서 신경세포로의 분화를 유도하는 Ngn2의 발현도 Gli3-/- 생쥐에서 정상 생쥐에 비해서 지연되었다. HuC/D, Isl1 그리고 Ngn2의 발현 결과들은 Gli3-/- 생쥐의 등쪽신경관에서 신경분화가 지연되었음을 의미한다. 이상의 결과들는 Gli3가 등쪽신경관에서 신경전구세포의 세포분열과 분화에 관여함을 의미한다.
Essential roles of Gli3 in ventral neural tube have been stressed from studies of Shh-/- and Shh-/-; Gli3-/- mutants. However, roles of Gli3 in dorsal neural tube have not been fully appreciated despite of its high expression. To find out roles of Gli3 in dorsal neural tube, we studied cell proliferation and neuronal differentiation in dorsal neural tube of Gli3-/- mutant. In Gli3-/- mutant, proliferation of progenitor cells in dorsal neural tube is increased compared to wild type embryos based on phosphohistone 3 immunohistochemistry and BrdU experiment. The appearances of HuC/D positive and Isl1 postive cells which represent postmitotic neurons and dI3 interneurons were delayed in Gli3-/- mutant compared to wild type embryo. The appearance of a proneural gene, Ngn2 was also delayed in Gli3-/- mutant compared to wild type embryo. Neuronal differentiation of progenitor cells in dorsal neural tube was delayed in Gli3-/- mutant compared to wild type embryos based on HuC/D, Isl1 and Ngn2 expressions. These results suggest that Gli3 plays important roles in cell proliferation and neuronal differentiation in dorsal neural tube. Thus our data shed a new light on the role of Gli3 in the development of neural tube.
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