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학술저널

흰쥐 척수 뇌실막구역에서 발달 단계에 따른 Nestin, BrdU 및 GFAP 면역반응성의 변화

Immunohistochemical Changes of Nestin, BrdU, and GFAP in the Cells of Rat Spinal Ependymal Zone According to Their Developmental Stages

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최근 뇌실막층 혹은 뇌실막밑층에 존재하는 다분화능 전구세포에 대한 연구가 여러 연구자들에 의해 활발히 진행 중에 있다. 그러나 이와 관련된 대부분의 연구는 뇌를 중심으로 이루어져 왔거나 중추신경계통에 치명적인 상해를 입힌 후 얻어진 결과를 토대로 진행되어 왔다. 따라서 정상 발달단계에 따른 척수중심관 뇌실막층 세포에 대한 연구는 미흡한 실정이다. 이에 저자들은 nestin, bromodeoxyuridine (BrdU), glial fibrillary acidic protein (GFAP) 항체를 이용한 면역조직화학법을 통해 흰쥐의 정상 척수 발달단계에 따른 뇌실막층 세포들의 분열 및 분화 양상을 확인하고자 하였다. 배 발생 14일, 척수중심관 뇌실막층을 구성하는 많은 세포들 중날개판 및 바닥판을 구성하는 대부분의 세포들이 nestin에 강한 면역양성반응을 보였다. 또한 이들 중 많은 세포들이 BrdU에 면역양성반응을 보여 세포분열이 활발히 진행되고 있음을 확인할 수 있었다. 반면 출생일을 기점으로 nestin에 면역양성반응을 보이는 세포들은 거의 사라지고, 출생 후 7일부터는 어떤 세포도 nestin에 면역양성반응을 보이지 않았다. 그러나 nestin의 발현이 사라진 후에도 다수의 세포들이 출생 후 14일까지 BrdU에 면역양성반응을 보여 어느 정도 분화가 진행된 후에도 척수중심관 뇌실막층 세포들에서 세포분열이 지속된다는 사실을 확인할 수 있었다. 반면 GFAP에 면역양성반응을 보이는 세포들은 전 실험과정에 걸쳐 확인할 수 없었다.

Recently, there has been considerable attention focused on the multipotent progenitor cells existing in ependymal and subependymal layer. However, almost all results have been derived from brain or injured CNS researches. So, the studies on the developmental characteristics of intact spinal ependymal layer have been relatively ignored. In the present study, we labeled rat spinal cord with nestin, bromodeoxyuridine (BrdU), and glial fibrillary acidic protein (GFAP) antibodies in order to track the differentiation and proliferative capacity of rat ependymal layer cells according to their developmental stages. At embryonic day 14 (E14), a number of cells in the spinal ependymal layer, especially constituting the alar and basal plates, showed extensive nestin immunoreactivities (ir). They also showed active proliferative capacities, because many nuclei of nestin-ir cells were also BrdU-ir. From postnatal day 0 (P0), nestin-ir cells were almost completely disappeared, and from P7, no nestin-ir cells could be detected. However, BrdU-ir nuclei continued to be identified until P14. These results suggested that the cells in the spinal ependymal layer retain their proliferative capacity until later stage of development. On the other hand, no GFAP-ir cells could be identified in the ependymal layer in our experimental period.

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