Eph 수용체와 그의 ligand인 ephrin은 발생과정에서 매우 특이적인 발현을 보여주며 세포간의 반발(repulsion) 또는 부착 (adhesion) 을 유도하여 신경 줄기 안내 (axon guidance), 세포 이동 (cell migration), 세포의 분할(cell segregation)을 통해 신경계 형성에 중요한 역할을 하고 있다. 본 연구에서는 형질전환 마우스를 이용한 in vivo mapping을 통해 EphA8수용체의 특이적인 발현을 조절하는 cis-acting element를 동정하였다. 그 결과 ephA8의 translation start codon으로부터 5′ 방향으로 약 10 kb 떨어진 지역의 180 bp DNA가 EphA8수용체의 발현에 관여하는 중요한 cis-acting element임을 밝혀냈다. 나아가 180 bp enhancer내에서 3′ 방향으로 129 bp DNA가 ephA8 유전자의 발현을 직접적으로 조절하는 cis-acting element를 포함하고 있음을 증명하였다.
This study was aimed to map the 1 kb cis-acting DNA of ephA8 gene, which regulates the spatial and temporal expression in the anterior mesencephalon. It was demonstrated that the 1 kb ephA8 enhancer DNA was sufficient to drive the lacZ expression to the anterior mesencephalon under the human β-globin minimal promoter. It was also found that a 180 bp within the 1 kb enhancer DNA was highly conserved between human and mouse, and that this 180 bp DNA was capable of inducing the lacZ expression in the anterior mesencephalon under the ephA8 or human beta-globin basal promoter. Further analysis using 5′-55 bp deleted or 3′-55 bp deleted mutant DNA revealed that the 55 bp portion present at the 3′-end of 180 bp DNA was critical for the regulation of ephA8 gene expression in the anterior mesencephalon. Taken together, these results indicate that 180 bp ephA8 enhancer DNA contains cisacting elements for the regulation of ephA8 gene expression in the anterior mesencephalon.
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