적절한 자외선 조사가 정상 피부 각질화세포인 HaCaT 세포주와 편평상피암세포인 KUMA3 세포주에 미치는 영향을 세포생존율, 세포자멸사 비율 및 poly(ADP-ribose) polymerase (PARP)의 발현을 통하여 조사하였다. 자외선 조사량에 대한 세포생존율은 HaCaT 세포주에서 높게 나타났으며, 세포자멸사 비율은 KUMA3 세포주에서 더 높게 나타났다. HaCaT 세포주의 경우 5 J/m2의 자외선을 전처리한 후 50 J/m2의 자외선을 처리한 군은 50 J/m2의 자외선을 단독으로 처리한 군에 비하여 세포생존율이 12% 정도 유의적으로 증가하여 자외선 조사에 대한 적응반응을 보였다. 반면, KUMA3 세포주에서는 5 J/m2의 자외선을 전처리한 후 50 J/m2의 자외선을 처리한 군이 50 J/m2의 자외선을 단독으로 처리한 군에 비하여 더 높은 세포자멸사의 비율을 나타내었다. PARP 항체를 이용한 면역세포화학 염색에서 HaCaT 세포주는 자외선 조사에 대하여 대부분 양성반응을 보였지만 KUMA3 세포주는 50 J/m2의 자외선을 조사한 군부터 음성반응을 보이는 세포들을 관찰할 수 있었다. Western blot 분석에서 HaCaT 세포주는 50 J/m2의 자외선을 조사한 군부터 85 kDa의 PARP 단백질 분절이 나타났지만 116 kDa의 본래의 PARP 단백질 발현이 강하게 유지되는 반면, KUMA3 세포주는 50 J/m2의 자외선을 조사한 군부터 85 kDa의 PARP 단백질 분절이 강하게 발현되기 시작하였고 그 이상의 조사량에서는 116 kDa의 본래의 PARP 단백질은 사라지고 85 kDa의 PARP 단백질 분절만 발현되었다. 이러한 결과들은 적절한 자외선 조사가 편평상피암세포의 세포자멸사에 효과적일 수 있음을 제시한다.
The present study was investigated that the effects of suitable ultraviolet (UV) irradiation to the cell viability, apoptosis and expression of poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) in HaCaT and KUMA3 cell lines that are skin keratinocyte and squamous cell carcinoma, respectively. The cell viability of UV irradiation dose appeared high in HaCaT cell line, and the percentage of apoptotic cells appeared higher in KUMA3 cell line. The cell viability in HaCaT cell line pretreated with 5 J/m2 UV and subsequently treated with 50 J/m2 UV was higher than that only treated with 50 J/m2 UV. On the other hand, the percentage of apoptotic cells in KUMA3 cell line only treated with 50 J/m2 UV was higher than that pretreated with 5 J/m2 UV and subsequently treated with 50 J/m2 UV. Immunocytochemical stain using PARP antibody, the most cells show positive reaction of UV irradiation in HaCaT cell line, but some negative reaction cells observe from treated with 50 J/m2 UV in KUMA3 cell line. The expression level of PARP by western blot analysis, concomitant with generation of the 85 kDa fragment in HaCaT cell line from treated with 50 J/m2 UV though the 116 kDa band was still retained. On the other hand, the 85 kDa fragment appeared in KUMA3 cell line from treated with 50 J/m2 UV but the intact PARP of 116 kDa disappears in more doses. These results present that suitable UV irradiation can be effective to apoptosis in squamous cell carcinoma.
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