근육신경연접의 형성과정은 세포생물학 및 신경과학분야에서 세계적으로 많은 연구가 진행되고 있는 과제이며, 이 과정 중에 세포 사이의 물리적 접촉 혹은 유착이 중요하게 작용할 것으로 추정되고 있다. 그러나, 세포첩촉물질 특히 신경세포유착물질이 어떻게 변화되는지는 아직 규명되지 않은 부분이다. 본 연구에서는 근육신경연접을 형성하는데 관여하는 척수앞뿔신경세포와 뼈대근육세포를 Sprague-Dawley계 흰쥐에서 분리하여 동시에 배양하고 이 세포들 사이의 접촉 부위, 특히 신경돌기와 근육세포의 접촉부위를 투과전자현미경으로 관찰하고, 몇 가지 세포결합물질의 발현을 면역조직화학염색을 통하여 살펴보았다. 그 결과 척수앞뿔신경세포의 돌기와 뼈대근육세포는 아주 밀접하게 접촉하고 있으며, 신경연접소포를 가지고 있어 신경 근육연접으로 분화될 부위임을 확인할 수 있었다. 면역조직화학적 염색의 결과, 5A5는 드물게 신경세포의 표면에서만 관찰되었는데 5A5로 염색되는 신경세포는 아세틸콜린 수용체 복합체와 연관되어 있지 않았다. 5B8은 신경세포 표면에서만 관찰되고 아세틸콜린 수용체 복합체가 형성된 부위에서도 관찰되어 신경세포가 근육세포와 접촉하여 근육신경연접을 형성하는 경우에는 접촉부위에 존재하는 신경세포유착물질이 일반적인 형태에서 sialylated 형으로 변화됨을 보여주어 신경세포 돌기들의 다발형성과 유사함을 알 수 있었다. 이상의 결과는 신경근육연접의 형성에는 신경세포와 근육세포의 유착이 중요하며, 신경세포유착물질은 신경근육연접의 형성에 직접적으로 관여한다기보다는 두 세포의 접촉을 촉진시킴으로써 근육신경연접에서 두 세포가 분리되지 않도록 하는 역할을 수행한다고 추정된다.
Neuromuscular junction formation is one of the hot research area for understanding synapse formation, and the contact and adhesion between muscle and neurons during this procedure is regarded as one of important steps for synaptogenesis. The changes of neuronal cell adhesion molecules during nerve-muscle contats has not been revealed yet. In this study, we isolated skeletal muscle cells and ventral spinal cord neurons from Sprague-Dawley rats and observed the contact areas with a transmission electron microscpe and studied the presence of NCAM at the contact sites by immunohistochemistry. The ventral spinal cord neuronal processes contact intimately with skeletal muscle cells, some of which were submerged into the muscle surface and had synaptic vesicles. NCAM was expressed on neuronal processes, only sialylated form were associated with acetylcholine receptor aggregates. These results confirmed the significance of adhesion in neuromuscular junction formation and NCAM may participate in this process by preventing the separation of 2 cells at the contact site.
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