초기 신경세포의 분화과정을 이해하기 위하여 흰쥐 태자의 척수앞뿔에서 분리한 신경세포를 배양하여 형태적 변화와 축 삭의 형성과정을 위상차현미경, 주사전자현미경, 면역형광염색법 등을 사용하여 관찰하였다. 척수앞뿔신경세포는 polyethylenimine과 poly-L-Lysine으로 표면처리한 커버스립 위에 배양한 경우 성장 및 분화가 가장 잘 되었다. 배양계 내의 척수앞뿔신경세포는 그 돌기의 수와 길이를 기준으로 관찰한 결과, 분화과정에 따라 커텐형돌기를 가지고 있는 제1형, 짧은 돌기를 가지고 있는 제2형, 돌기의 길이가 길어지는 제3형, 긴돌기 혹은 가지를 친 돌기를 가지고 있는 제4형의 4 가지 형태로 순차적으로 분화되었다. 형태적 특징 및 면역형광염색의 결과로 판단한 축삭은 각 형에서 모두 관찰되었으나, 대부분의 돌기는 가지돌기의 특징을 가지고 있었으며 축삭은 가지돌기의 특징을 가지고 있는 신경돌기에서 기시하고 있었다. 이상의 결과를 근거로 배양계 내의 척수앞뿔신경세포는 홑극신경세포에서 두극신경세포, 뭇극신경세포로 순차적으로 분 화하며, 축삭의 형성은 두극신경세포에서 뭇극신경세포로 변화하는 단계에 이루어지는 것으로 판단된다.
To understand the early cellular differentiation of neurons, we studied the differentiation of ventral spinal cord (VSC) neurons in culture. Immunofluorescence techniques with myelin associated protein 2 (MAP2) and phosphorylated neurofilament heavy chain were used with phase contrast microscopy. VSC neurons were best grown and differentiated on the coverslips coated with polyethylenimine or poly-L-Lysine. During 3 days of culture, VSC neurons changed from a round cell with no neurites to multipolar neurons with an axon and dendrites. The differentiating VSC neurons could be classified into 4 types based on the shape and length of processes. The process with axonal character, that is MAP2 negative and phosphorylated neurofilament positive, was first identified at the tip of dendritic process when one or more processes grew out. Our results suggest that the formation of an axon in VSC neurons may follow the formation of dendrites.
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