본 연구는 Nitric oxide (NO)에 의하여 유발되는 배양 심장근육모세포의 손상에 칼슘이 어떻게 관여하는지에 대해서 조 사하였고 다음과 같은 결과들을 얻었다. 1. Nitric oxide (NO)의 donor인 SNP와 SNAP는 H9c2 세포에서 세포손상을 유도하였다. 2. MAP kinase중 ERK의 저해제인 PD98059를 SNP를 처리하기 15분전에 처리하였을 때, SNP에 의한 세포손상을 억제하였다. 3. 칼슘 chelater인 BAPTA/AM을 SNP를 처리한 후 3시간 안에 처리했을 때, SNP에 의한 세포손상을 억제하였다. 또한 L-type과 T-type의 칼슘 차단제를 SNP를 처리하기 15분전에 처리하였을 때, SNP에 의한 세포손상을 억제하였다. 4. SNP 세포손상에 대한 BAPTA/AM의 효과는 단백질합성 억제제인 cyclohexamide와 NF-kB의 저해제인 PDTC를 처리하였을 때 현저히 억제되었다. 이상의 결과들을 종합하여 볼 때, NO에 의한 배양 심장근육모세포의 손상은 MAP kinase중 ERK를 매개로 하여 세포손상을 일으키고, 이때 칼슘이 매우 중요하게 관여하는 것으로 생각된다. 또한 NO에 의한 세포손상 3시간까지 칼슘은 NFkB의 활성을 직접 억제하거나 NF-kB의 활성과 관련된 단백질의 전사를 억제함으로써 세포손상을 유발시키는데 관여하리라고 생각한다.
Nitric oxide (NO) elevates intracellular calcium. But the actions of calcium in NO-induced cell death are not well understood. This study was carried out to investigate the signal transduction pathways of calcium and NO-induced cytotoxicity in H9c2 cardiac myoblasts by using NO donor compounds such as sodium nitroprusside (SNP) and Snitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP). Pretreatment of intracellular calcium chelating agent (BAPTA/AM) or L-type calcium channel blockers (nicardipine, nifedipine, diltiazem and veraparmil) or T-type calcium channel blocker (flunarizine) blocked SNP-induced cytotoxicity respectively only in a three hours. However, thapsigargin (TG), which inhibits endoplasmic reticulum dependent Ca2+-ATPase and thereby increases cytosolic Ca2+, augmented SNP-induced cytotoxicity. The protective effect of BAPTA/AM was inhibited by treatment of protein synthesis inhibitor, cyclohexamide. In addition, pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC), NF-kB inhibitor, attenuates the protective effect of BAPTA/AM against SNP-induced cytotoxicity. It is indicated that the protective effect of BAPTA/AM against NO-induced cytotoxicity might be due to the expression of protein related to activation of NFkB. From these results, it is concluded that SNP-induced cytotoxicity is mediated by calcium in a 3 hours via down regulation of protein expression rleated to activation of NFkB.
(0)
(0)