생쥐의 배자에서 유래한 기형암종세포 (teratocarcinoma cell)인 P19 세포가 retinoic acid (RA) 처리에 의해 신경세포로 분화되는지를 신경세포-특이 단백질의 발현을 통해 확인하고 2-mercaptoethanol (2-ME) 및 ascorbic acid (AA)가 P19 세포의 분화과정에 어떠한 영향을 미치는지를 조사하였다. RA에 의해 분화된 P19 세포는 신경세포의 형태적 특징을 나타내었고 신경세포-특이 단백질인 neural cell adhesion molecule (NCAM), neuron-specific enolase (NSE) 및 calss III β-tubulin의 발현이 크게 증가한 반면 별아교세포의 특이 단백질인 glial fibrillary acidic protein (GFAP)의 발현은 관찰할 수 없었다. 또한 AA와 2-ME이 P19 세포의 분화에 미치는 영향을 조사한 결과, AA를 처리한 경우에 있어서 신경세포-특이 단백질이 발현되는 세포의 비율은 AA를 처리하지 않은 경우보다 증가하는 경향을 보였으나 2-ME은 RA에 의한 P19 세포의 분화과정에 뚜렷한 영향을 미치지 않았다. 본 연구의 결과는 retinoic acid에 의해 P19 세포가 신경세포로 분화된다는 사실을 보여주는 것으로 신경세포의 분화 및 신경세포이식 연구에 있어서 P19 세포의 이용 가능성을 제시하고 있다.
P19, murine embryonal carcinoma (EC) cells can be induced to differentiate into neurons in the presence of retinoic acid (RA). To investigate neuronal differentiation of P19 cells in details, P19 aggregates were obtained in the presence or absence of RA, ascorbic acid (AA) and 2-mercaptoethanol (2-ME) in bacteriological Petri dishes. When the aggregates were transferred into the serum depleted medium, P19 cells exhibited dramatic morphological changes. Cells contained long and thin processes as detected in differentiated neurons. Western blot analysis showed that treatment of RA and AA induced expression of neuron-specific markers such as NCAM, NSE and Tuj1. Expression of GFAP was not detected, suggesting that P19 cells differentiate into neurons under our experimental condition. Immunocytochemical studies also revealed that treatment of RA and AA increased expression of NCAM and Tuj1. On the contrary, 2-ME was ineffective in the neuronal differentiation of P19 cells, which is consistent the results from the western blot analysis. These results suggest that differentiated P19 cells have similar characteristics to those of typically differentiated neurons. This study also suggests that P19 cells may provide useful tools to study neuronal differentiation in vitro.
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