Paclitaxel로 처리한 HeLa 및 L929 암세포주에서 생기는 β-actin, fibronectin 및 laminin의 세포질 내 분포의 변화가 형태학적인 변화와는 어떤 연관이 있는지를 알아보기 위해 본 실험을 시행하였다. 이 약제에 의한 세포증식의 조절에 관하여는 MTT 분석을 하였고, 위에서 언급된 세포질 내 단백질들의 변화는 면역세포화학적 방법과 analySIS AUTO로 분석하였다. 세포의 형태적인 변화들은 도립현미경과 투과전자현미경으로 관찰하였다. MTT 분석 결과로는 paclitaxel 1 μM과 10 μM의 농도에서 HeLa 세포는 세포성장이 대조군에 비해 20~80% 억제되었고 L929 세포는 27~44% 억제되었으며, 그 효과는 약제의 용량과 시간에 따라 증가되었다. β-actin, fibronectin 및 laminin의 분포는 핵 주변부에서 강한 반응을 보였던 것이 약제 처리 후 세포질 전체에 고루 분포하면서 약한 반응을 나타냈다. 형태학적인 변화로는 2가지 종류의 세포 모두에서 이질염색질의 증가, 과립형질내세망의 부착리보소체의 떨어짐 및 골지복합체의 절편화를 쉽게 볼 수 있었다. 따라서, paclitaxel에 의한 이들 세포의 성장억제와 형태학적인 변화들은 위의 세가지 종류의 단백질들의 재배열과 그 합성의 감소와 밀접히 연관될 것으로 생각된다.
The aim of this investigation was to elucidate the changes in the cytoplasmic distribution of β-actin, fibronectin, and laminin through mainly the morphological changes occurring in HeLa and L929 cancer cell treated with paclitaxel. Whether or not paclitaxel regulates cell proliferation was assessed with MTT assay. Possible influence on the distribution of β-actin, fibronectin, and laminin in these cells was confirmed with immunocytochemistry and analySIS Auto software program. The changes in cell morphology were observed under inverted and electron microscope. The MTT assay showed that 1 μM and 10 μM concentrations of paclitaxel inhibited HeLa cell growth approximately by 20% to 80% and L929 cell by 27% to 44% in a dose- and time-dependent manner. The distribution of these proteins was changed from the condensed around nucleus and strong reaction to the weak throughout cytoplasm. The morphological changes indicated that paclitaxel changes the location or number of protein synthesis apparatus: damages of RERs, Golgi complex, and increase of heterochromatin. These data suggest that the growth inhibition and morphological changes of tumor cells induced by paclitaxel might be modulated by the rearrangement and decreased production of β-actin, fibronectin, and laminin in cytoplasm.
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