본 연구는 SAMP10 (senescence-accelerated prone mouse)과 이에 대한 대조군인 SAMR1 (senescence-accelerated resistantmouse) 생쥐의 혈관으로 HRP (horseradish peroxidase)를 주입한 후, 뇌의 혈관주위세포에서 HRP에 대한 포식을 분석하였다. 이를 위하여 성숙군으로 생후 3개월령의 SAMP10과 SAMR1을 사용하였고, 노화군은 생후 12~14개월령을 사용하였다. 실험동물의 꼬리정맥에 HRP 용액을 주입하고 2시간 뒤에 심장으로 관류고정 한 다음, 뇌를 적출하고, 진동절편기를 이용하여 조직절편을 제작하였다. 뇌조직 절편을 DAB 용액에서 반응시키고, 광학현미경 및 전자현미경 표본을 제작하였다. 광학현미경 하에서 HRP-DAB 반응물은 뇌의 미세혈관의 혈관주위세포에서 관찰되었는데, 특히, 생후 3개월령의 SAMP10 에서 그 수가 가장 많았고, 염색반응강도가 가장 높았으며, 생후 12~14개월령의 SAMP10에서는 그 빈도와 반응 강도가 감소하였다. 전자현미경 관찰 결과, HRP-DAB 반응물은 모든 동물군의 뇌 미세혈관의 내피세포에서도 관찰이 되었으며, 뇌의 세동맥과 세정맥의 혈관주위포식세포에 분포함을 확인하였다. 노화군의 SAMP10에서는 혈관주위포식세포에 지방성 의 소포가 세포질을 거의 가득 채우고 있었고, 이런 세포에서는 HRP가 거의 관찰되지 않았다. 본 연구에서, 혈관으로 주 입한 HRP가 성숙군의 SAMP10의 혈관주위포식세포에서 매우 강하게 관찰된다는 것은 SAMP10에서 뇌의 내피세포를 통한 물질 이동이 증가해 있음을 암시한다. 또한, 뇌혈관주위포식세포의 포식능력은 노화에 따라 저하되며, 이는 노화에 따른 이 세포의 세포질 변화와 연관이 있을 것으로 보여진다.
The present study examined the uptake of blood-borne horseradish peroxidase (HRP) by perivascular cells in the senescence-accelerated mouse prone-10 (SAMP10) and the senescence-accelerated mouse resistant-1 (SAMR1) brains. SAMP10 and SAMR1 brains were studied from mice of each of the following ages: 3 months old SAMP10, 12~14 months old SAMP10, 3 months old SAMR1, and 12~14 months old SAMR1. Animals were injected via a tail vein with HRP (type VI) solution. Two hours later animals were transcardially perfused with 4% paraformaldehyde and 1% glutaraldehyde mixture. After sectioning with a vibrating microtome, brain sections were stained using a DAB solution. Products of the HRP-DAB reaction were frequently and intensely labelled in the perivascular cells along the microvasculature, especially in the young SAMP10 brain. Electron microscopy revealed that the reaction products were evident in the endothelium of the microvasculature, as well as the perivascular phagocytes of arterioles or venules. In the aged SAMP10, the number of perivascular cells showing HRP-reaction products was lower than in the young SAMP10. Under the electron microscope, the perivascular cells of the aged SAMP10 brain showed very weak intensity of HRP staining, and these cells contained abundant foamy vacuoles or lipid droplets. In both young and aged SAMR1 brains, labelled perivascular phagocytes were very occasionally found. In summary, the present results showed increased uptake of blood-borne HRP by perivascular phagocytes in the young SAMP10 brain, and the age-related decrease of this labelling, which suggests altered microvascular barrier function with aging in the SAMP10 brain.
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