나이에 따라 혈관평활근 세포증식에 미치는 fetal bovine serum,angiotensin II 및 phorbol 12-myristate 13-acetate의 영향

Effect of Age on Proliferation of Rat Vascular Smooth Muscle Cells Stimulated with Fetal Bovine Serum, Angiotensin II and Phorbol 12-Myristate 13-Acetate

본 연구는 개체의 나이에 따라 혈관 평활근 세포의 성장의 차이를 나타내는지 보기 위하여, 흰쥐 대동맥에서 평활근세 포를 일차 배양하여 세포 성장촉진물질인 fetal bovine serum (FBS), angiotensin II (Ang II) 및 phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)에 대한 세포증식 반응 양상을 비교하였다. 일차 배양에 이용한 흰쥐는 나이에 따라 4군으로 나누었는데 5, 9, 12와17주령으로 하였다. 세포증식은 1%, 5% 및 10% FBS 농도에 비례하여 증가하였고, 10% FBS에서 세포증식은 5주령군에 비하여 다른 군들이 유의하게 높았다. 다양한 농도의 Ang II (0.1~10 μM)를 5% FBS 배지에서 자극한 경우, 5주령군을 제외한 다른 군들에서 세포 증식이 유의하게 증가하였다. 그러나 0.1% BSA나 10% FBS 배지에서는 Ang II의 세포증식 촉진작용이 나타나지 않 았다. Ang II의 성장촉진 효과가 FBS나 세포 내에 존재하는 Ang II의 작용에 의한 것인지 알아보기 위하여 Ang II 수용체억제제인 ibersartan과 angiotensin 전환효소 억제제인 captopril 10 μM을 각각 5% FBS로 배양되는 모든 세포군에 처치하여본 결과 세포 증식에 영향이 없었으므로, FBS에 의한 세포 증식이 Ang II와는 관련이 없는 것으로 나타났다. PMA를 10과100 nM의 두 농도로 5%와 10% FBS, 그리고 0.1% BSA 배지에서 처치하였는데, 5% FBS 배지에서만 9와 17주령군의 세포증식이 증가하였다. Ang II의 경우와 마찬가지로, 0.1% BSA와 10% FBS 배지에서는 PMA가 세포증식에 유의한 영향이 없었다. 이상의 결과는 개체의 나이에 따라 혈관 평활근 세포의 증식 반응이 다르며, Ang II와 PMA는 5% FBS에 의한 세포증식을 더 촉진함을 나타내고 있다.

The present study investigated effects of fetal bovine serum (FBS), angiotensin II (Ang II) and phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) on proliferation of vascular smooth muscle cells (VSMC) isolated from aorta of 5, 9, 12 and 17 week old Sprague-Dawley rats. With 10% FBS, proliferation rate of VSMCs was markedly greater in 17 week old group than in 5 week old group. Treatment of 0.1~10 μM Ang II or 10 and 100 μM PMA in 0.1% bovine serum albumin and 10% FBS media did not influence the cell proliferation. However, in 5% FBS media, Ang II and PMA enhanced the proliferation of the VSMC from all age groups except 5 week. To test the effects of Ang II in the FBS, captopril, an Ang converting enzyme inhibitor, and ibersartan, an Ang II receptor antagonist, were pretreated. Neither 10 μM captopril nor ibersartan in 5% FBS influenced the VSMC proliferation. These results indicate that the VSMCs from older rats proliferate faster than those from 5 week-old rats, and 5% FBS-induced proliferation was enhanced by Ang II and PMA.