학술저널
Expression of the E6 oncoprotein of the high-risk human papillom avirus type 16 in Escherichia coli
- 호서대학교 기초과학연구소
- 기초과학연구 논문집
- 제20권 제1호
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2012.1247 - 56 (10 pages)
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인유두종바이러스 (Human papillomavirus, HPV) E6 종양단백질은 종양억제유전자인 p53 을 불활성화시켜 세포주기의 이상을 가져와 자궁경부암 발생의 원인이 된다. 본 연구는 고위험형 HPV 유형 16으로부터 E6 종양단백질을 암호하는 유전자를 융합 파트너 thioredoxin(TrxA) 유전자가 도입된 대장균 발현 벡터 coli expression vector) pET32a(+) 에 클로닝하였다. 재조합 발현벡터 pET-HPV-16E6 로 형질전환된 E. coli BL2KDE3) 숙주세포를 0.1 mM의 IPTG 농도로 24°C 에서 4시간 동안 발현을 유도하였다. 비수용성으로 발현된 재조합 융합단백질 TrxA-HPV-16E6 를 8 M urea가 포함된 인산완충용액으로 가용화시킨 후, SDS-PAGE 분석으로 약 36 KDa인 TrxA-HPV_16E6가 최적 발현되었음을 확인하였다 . TrxA_HPV_16E6 는 Ni2+_chelating column 의 약 130 mM imidazole의 농도에서 약 76.1% 의 수득율과 80%의 순도로 효과적으로 분리되었다 .
Ⅰ. 서 론
Ⅱ. 재료 및 방법
Ⅲ. 결과 및 고찰
Ⅳ. 참고문헌
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