전기자극에 의한 제브라피쉬(Daio rerio) 세포융합 연구

Study of Electro Cell Fusion on the Zebrafish Cell, Danio rerio

어류 세포에서의 교류(AC)와 직류(DC) 세기에 따른 세포융합에 미치는 영향을 조사하였다. 교류(AC) 세기 15Vrms에서 자극시간은 15sec로 하였으며, 직류(DC)세기는 각각 10V, 15V, 20V, 25V 그룹의 경우 자극시간 30usec, 자극 간격 0.5sec, 자극 횟수 3회로 설정하여 진행한 그룹의 경우, 직류세기 10V, 15V에서 세포 융합이 이루어졌으나 20V, 25V에서는 세포파괴가 관찰되었다. 또한 교류(AC) 세기 20Vrms에서 자극시간은 15sec, 직류(DC)세기는 각각 10V, 15V, 20V, 25V 그룹의 경우 자극시간 30usec, 자극 간격 0.5sec, 자극 횟수 3회로 설정하여 진행한 그룹에서도, 직류세기 10V, 15V에서 세포융합이 이루어졌으나 20V, 25V에서는 세포파괴가 관찰되었다. 결과적으로 제브라피쉬 체절단계의 세포의 융합에 있어 직류 세기는 10-15V가 적정 강도로 확인 되었다. 20V 이상에서 세포 파괴가 이루어진 것으로 보아, 조직세포의 세포막은 20V이상에서는 과도한 영향을 받은 것으로 판단되었다. 또한 체절단계 이전의 상실기의 세포를 대상으로 똑같은 자극 조건으로 예비실험을 수행한 결과에 따르면, DC 10V와 15V에서 세포파괴가 관찰된 것과 비교했을 때, 난할단계에 따라 전기자극 강도가 심한 영향을 미치는 것으로 판단되었다.

To investigate the effects of electro cell fusion on the zebrafish cells with the different combination of electric intensity, direct current and alternating current. Zebrafish cells were exposed to an alternating current (AC, 15Vrms) field to induce a linear cell alignment, and then a direct current (DC, 10V, 15V, 20V, and 25V, 30usec pulse, 0.5sec interval, and 3 times) pulse was applied to facilitate transient electrofusion. In case of DC 10V and 15V, cells were fused each other, but other group cells were destroyed in DC 20V and 25V. In the alternating current (AC, 20Vrms) and same DC condition, cells were fused each other, but other group cells were destroyed in DC 20V and 25V in the same manner. Therefore, Optimum direct current (DC) was identified as DC 10-15V regardless of an alternating current (AC) in zebrafish somite stage cells.