Isolation and characterization of glycolipid antigens from mycobacterium bovis for the serodiagnosis of bovine tuberculosis

우형결핵균(Mycobacterium bovis)에 속하는 항산균은 세포벽의 주요 성분이 지질복합체로 구성되어 있다. 이 지질 복합체는 항산균질병의 병리기전에 중요한 역할을 하며, 여러 종류의 균종 또는 혈청형 특이항원을 포함하고 있다고 밝혀졌으나 M. bovis의 지질항원을 이용한 우결핵 혈청진단 응용연구는 미흡한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 우형결핵균에서 지질성분을 추출하여 분획한 후 항원성이 높은 분획을 이용하여 우결핵의 혈청진단에 응용성을 조사하고자 하였다. 우혈결핵균체에서 CHCl₃:CH₃OH(2:1) 용액으로 추출한 지질을 Florisl column에 흡착시킨 다음 CHCl₃ 용액에 CH₃OH함량을 증가시키면서 용출되는 당지질성분 (glycolipid: GL)을 항원분석에 이용하였다. 검사한 9개의 분획 가운데 CH₃OH함량이 5% (GL5)와 40% (GL40)인 용액으로 분획한 것이 M. bovis BCG에 대한 토끼혈청 또는 우결핵 양성우의 혈청과 비교적 높은 반응성을 보였다. GL5 및 GL40분획 모두 M. bovis이외 13종의 항산균에 대한 토끼혈청과 반응하지 않거나 매우 미약한 정도의 반응을 나타내 우형결핵균에 특이한 항원성분을 함유하였다. 특히 GL5분획은 우결핵균 특이항원인 mycoside B항원과 항체반응능의 높은 상관관계를 나타내 GL5의 주요 성분은 mycoside B일 것으로 추정되었다. 우결핵 피내반검사 양성인 29두의 혈청을 대상으로 GL5와 GL40항원에 대한 항체반응 정도를 효소결합면역분석법(ELISA)을 이용하여 조사한 결과 두 항원간에 상관관계는 매우 낮았다. 일부 혈청에서는 GL5 및 GL40항원 모두에 비교적 높은 항체반응성을 나타냈으나, 일부 항체에서는 GL5항원에만 또는 GL40항원에만 높은 반응을 나타내 우형결핵균에 감염시 숙주의 항체반응이 각 항원에 대하여 매우 다양함을 보였다. 따라서 GL5항원 또는 GL40항원을 이용하여 우결핵의 혈청진단에 응용하기 위해서는 피내반응 음성우를 비롯하여 보다 많은 수의 혈청을 대상으로 민감도와 특이도에 대한 연구가 선행되어야 할 것이다.