동물성 식품내 퀴놀론계 항균물질 검출을 위한 여지디스크배지 확산법

Paper-disk assay based on agar diffusion method for detecting quinolones in foods of animal origin

E. coli ATCC 11303을 이용하여 여지디스크 확산법을 개발하여 우유, 닭고기 및 어류의 조직내 퀴놀론계 항균물질의 최소검출한계, 항균제별 검출범위, 시료별 비특이반응 및 평판배지의 안정성을 관찰하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 여지디스크확산법의 우유내 퀴놀론계 항균물질의 최소검출한계는 ciprofloxacin과 enrofloxacin이 10㎍/kg 이하였다. 그리고 norfloxacin, sarafloxacin, flumequine 및 oxolinic acid는 400㎍/kg 이상에서 검출 가능하였다. 2. 여지디스크확반법의 식육내 퀴놀론계 항균 물질의 최소검출한계는 ciprofloxacin과 enrofloxacin이 30㎍/kg 이하 이었다. 그리고 norfloxacin, sarafloxacin, flumequine 및 oxolinic acid는 1200㎍/kg 이상에서 검출 가능하였다. 3. 퀴놀론계 이외의 일반 항균물질에 대한 여지디스크확산법의 우유내 양성반응은 항균물질의 높은 농도에서도 관찰되지 않았다. 4. 여지디스크확산법에 대한 음성시료의 위양성 반응은 유당분해효소를 첨가한 유당분해우유(Lactaid milk), 닭고기 부위중 적색을 나타내는 Chicken dark, 연어(Salmon) 및 새우(White shrimp)의 살코기 부분에서 위양성 반응을 나타내었다. 위양성 반응을 나타내는 시료를 MSU buffer로 5배 추가 희석한 수 실험하였을 때 유당분해우유(Lactaid milk)를 제외한 시료에서는 더이상 위양성 반응을 나타내지 않았다. 5. 여지디스크확산법 시험용 평판배지의 보존성은 4℃에 보관하였을 때 17일 동안 안정하였다.

For the screening of antibiotic residues in milk and meat, microbiological inhibitor tests are commonly applied. Traditionally, microbial inhibition assays have been used to screen large amounts of samples for antibiotics, and these assays are still widely used today. However, the sensitivities of the microbiological inhibitor assays that are used to reveal the presence of antibiotic residues in milk and tissues are generally insufficient to detect quinolone type drugs at levels of interest. The present study was designed for detecting quinolones in various matrices by microbiological inhibition assay. Paper-disk assay based on agar diffusion method with E. coli using specially developed nutrient agar was developed. Minimum detection level in milk by paper-disk assay based on agar diffusion method with E. coli was 5㎍/kg, 10㎍/kg,＞400㎍/kg,＞1,000㎍/kg,＞1,000㎍/kg,＞500㎍/kg for ciprofloxacit enrofloxacin, norfloxacin, sarafloxacin flumequine, oxolinic acid, respectively, and in meat 15㎍/kg, 30㎍/kg,＞1,200㎍/kg,＞3,000㎍/kg,＞3,000㎍/kg,＞1,500㎍/kg for ciprofloxacin, enrofloxacin, norfloxacin, sarafloxacin, flumequine, oxolinic acid, respectively.