Murine Macrophage RAW 264.7 세포에서 구실잣밤나무 추출물의 항염증 효과

Anti-inflammatory Effect of Castanopsis cuspidata Extracts in Murine Macrophage RAW 264.7 Cells

본 연구는 구실잣밤나무(C. cuspidate) 잎 추출물의 항염증활성이 염증성 매개인자 생성 저해 및 염증성 사이토카인의 억제와 관련이 있을 것으로 예상되어짐에 따라, 구실잣밤나무를대상으로 80% 에탄올를 가지고 추출한 후 추출물을 극성에 따라 순차적으로 용매분획을 실시하여, 구실잣밤나무 80% 에탄올 추출물 및 용매분획물들이 염증반응의 주체가 되는 대식세포 계열인 RAW 264.7 세포에서 LPS로 유도된 NO의 생성억제효과, 그리고 iNOS와 COX-2의 mRNA와 단백질 발현 억제효과 및 IL-6와 IL-1β와 같은 염증성 사이토카인 생성 억제효과등을 알아보았다. 대식세포 계열인 RAW 264.7 세포에 LPS로자극을 주고 구실잣밤나무 80% 에탄올 추출물 및 분획물을 처리하여 확인해본 결과, 헥산, 디클로로메탄 및 에틸아세테이트분획물에서 NO의 생성억제 효과가 강하게 나타났으며, 헥산과디클로로메탄 분획물에서는 iNOS와 COX-2 생성 억제 효과가다른 분획물에 비해 강하게 나타났으며 염증성 사이토카인 생성 억제 효능도 80% 에탄올 추출물 및 분획물들이 다소 차이는있었지만 헥산과 디클로로메탄 분획물에서 IL-6와 IL-1β에서생성억제 효과가 나타났다. 이러한 결과는 구실잣밤나무 잎에서 유효성분 추출을 통한 항염증 물질의 연구 또는 예방하거나치료할 수 있는 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에중요한 기초 자료가 될 것이라 사료된다. 또한 구실잣밤나무 추출물로부터 염증억제 성분을 도출하고자 활성분획인 디클로로메탄 분획물에 대하여 활성성분의 분리가 진행 중이다.

This study describes a preliminary evaluation of the anti-inflammatory activity of Castanopsis cuspidata extracts. C. cuspidata was extracted using 80% ethanol and then fractionated sequentially with n-hexane, dichloromethane, ethylacetate, and butanol. To screen for anti-inflammatory agents effectively, we first examined the inhibitory effect of the C. cuspidata extracts on the production of pro-inflammatory factors and cytokines stimulated with lipopolysaccharide. In addition, we examined the inhibitory effect of C. cuspidata extracts on pro-inflammatory mediators (NO, iNOS, COX-2) in murine macrophage RAW 264.7 cells. The amounts of protein levels were determined by immunoblotting. Of the sequential solvent fractions of C. cuspidata, the n‑hexane, dichloromethane and ethylacetate fractions inhibited the mRNA expression of pro-inflammatory cytokines (IL-1β and IL-6), production of NO, and the protein level of iNOS and COX-2. These results suggest that C. cuspidata may have significant effects on inflammatory factors and may be provided as a possible anti-inflammatory therapeutic plant.