자작나무 동아의 액체질소 내 초저온 보존

Cryopreservation of winter vegetation buds of Betula platyphylla var. japonica in liquid nitrogen

자작나무 식물유전자원의 효과적인 장기보존 방안을 구명하기 위해 동결전처리 된 겨울철 동아를 건조처리에 의해 초저온보존 시험하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 자작나무 동아는 내동성이 최고조에 달한 1월 20일경의 함수율이 42.43%로 가장 낮게 나타났다. 1월 20일에 채취한 동아를 10분간의 건조처리 와 5~-20℃까지 1분당 1℃ 하강조건으로 완속동결 전처리하여 -196℃의 액체질소에 초저온 보존한 경우의 세포생존율은 83.33%로 가장 이상적인 처리조건으로 조사되었다. 자작나무 동아의 시료조제는 동아에 약간의 목질부 조직을 붙여 초저온 보존하는 경우에 86.7%로 세포생존율이 높게 나타났다. 24시간 이상 액 체질소에 초저온 보존한 자작나무 동아는 40±5℃의 온수 중에서 급속 해동하는 경우가 86.6%의 세포생존율을 비롯하여 60%의 식물체 재생율을 나타내어 본 실험에서 가장 효과가 좋은 것으로 조사되었다.

In woody plant germplasms, using prefrozen dormant buds for materials is one way to achieve successful cryopreservation. The protocol of cryopreservation for White birch (Betula platyphylla var. japonica) winter vegetative buds is the following. First, the branches of White birch were collected in January 20, when the vegetative buds were still in a state of quiescence. The winter buds with about 5㎜ of xylem tissue were removed from the branches. They were dehydrated to moisture contents about 44% by air dry treatment. The buds were prefrozen, with the temperature being decreased by 5∼-20℃ and then transfered to the LN(liquid nitrogen) maintained below -l96℃. After cryopreservation, the vegetative buds were rapidly thawed in a water bath at 40±5℃. In this case, the cell survival rate of samples was about 86%. After sterilization, buds were then cultured on MS medium. These results demonstrate the feasibility for cryopreservation of winter vegetation buds of Betula platyphylla var. japonica.