Pleurotus ostreatus에서 분비되는 Peroxidase의 특성

Characterization of Extracellular Peroxidase from Pleurotus ostreatus

PIeurotus ostrealus의 배양액에서 syringic acid에 의해 유도되는 peroxidase의 활성이 추정되었다. 본 효소는 DEAE Sephadex A-50 이온교환크로마토그래피와 Sephadex G-150 첼 여과크로마토 그래피를 통하여 순수분리 되었다. 순수분리된 효소는 당함량이 35.7%인 당단백젤이었으며. SDS-linear polyacrylamide gradient gel 전기영동과 젤여과크로마토그래피에 의해 분자량(Mr) 72.400인 2개의 동일한 소단위체로 이루어진 이합체로 판명되었다. 본 효소는 흡광 스펙프럼의 분석결과, iron protoporphyrin IX의 구조를 갖는 2개의 heme을 조효소로 가지고 였는 것으로 추정되였다. 본 효소의 등전점은 4.26 이었고 $H_2O_2$에 대한 $K_m$값은 $7.2{\mu}M$이었다. 본 효소의 반응 최적온도는 $40^{\circ}C$, 최적 pH는 3.5에서 4.0 사이였다. Ferulic acid와 sinapic acid에 대한 본 효소의 친화도(Km)는 horseradish peroxidase에 비해 각각 2.4. 12.3배 더 높은 것으호 계산되었다.

An extracellular peroxidase found in culture broth of Pleurotus ostreatus was induced by syringic acid. This enzyme was fractionated by DEAE Sephadex A-50 ion exchange chromatography and gel filtration chromatogrphy on Sephadex G-150. The enzyme is a glycoprotein containing 35.7% carbohydrate. The results of SDS-linear polyacrylamide gradient gel electrophoresis and gel filtration indicate that the enzyme is a dimer consisted of identical subunits (Mr=72,400). The absorption spectrum of the enzyme indicates the presence of one mole of iron protoporphyrin IX per one mole of subunit. Isoelectric point of the enzyme is 4.26 and $K_m$ values for $H_2O_2$ is $7.2{\mu}M$. The enzyme showed its optimal activity at pH 3.5-4.0 and at $40^{\circ}C$. The Km values of this enzyme for ferulic acid and sinapic acid are 2.4 and 12.3 times higher than those of horseradish peroxidase, respectively.