Rhizopus nigricans Ehrenberg의 Methanol 내성 유도

소수성 기질인 progesterone 을 수용성 반응액 속에 용해하기 위하여 사용되는 methanol 이 Rhizopus nigricans 의 성장과 progesterone 의 11.alpha.-hydroxylation 반응에 미치는 영향을 조사하고, 세포막 인지질의 불포화 지방산 함량을 증가시켜 유기용매에 대한 내성을 유도하였다. R. nigricans 의 균사체는 methanol 존재하에서 형태적인 변화를 일으켰으며, 세포막 인지질의 지방산 조성에 변화를 가져와 불포화 지방산, 특히 oleic acid 의 함량이 증가되었다. 세포의 고정화는 유기용매로부터 세포를 보호하여 progesterone 의 11-.alpha.-hydroxylation 율을 증가시켰다. 성장배지에 500.$\mu$g/l의 biotin 을 첨가하였을 때 세포막 인지질의 oleic acid 함랴이 증가되었으며 methanol 에 대한 내성이 증진되어 높은 progesterone 의 11 $\alpha$-hydroxylation 율을 얻을 수 있었다.

The effects of methanol. used as a solvent for the hydrophobic substrate progesterone. on the morphology of Rhizopus nigricans and 11$\alpha$-hydroxylation of progesterone was investigated. The methanol tolerance of the 11$\alpha$-hydroxylase system in polyacrylamide immobilized R. nigricans mycelia as well as in free mycelia has been induced by adding various unsaturated fatty acids. biotin and ions into the cultivation medium. Immobilization of the cell seemed to protect the cells from denaturation by methanol. It gave higher reaction rate of progesterone than the free mycelia in the presence of methanol.500 $\mu$g/l of biotin was found to be the most effective induction agent for the methanol tolerance among tested chemicals. R. nixricans cells sustained its enzymatic activity at higher methanol concentrations as a result of accumulation of unsaturated fatty acids. especially oleic acid. in the membrane phospholipid.