Cephalosporin C 생물전환을 위한 Trigonopsis variabilis (ATCC10679) 변이균주의 간편한 선별 및 D-amino acid oxidase 유전자 배열

Rapid Screening of Mutant Strains of Trigonopsis variabilis (ATCC10679) for Cephalosporin C Bioconversion and Sequences of D-amino acid oxidase Genes

Trigonopsis variabilis ATCC10679 (TW)의 변이균주를 선별하기 위하여 쉽고 간편한 균주 선별방법을 개발하였다. 변이 균주(T26)의 D-Amino acid oxidase (D-AAO)는 야생균주(TW)의 D-AAO 효소보다 cephalosporin C에 대한 기질특이성이 약 30% 높았다. 이들 두 균주에서 D-AAO 유전자를 클로닝하여 각 유전자를 비교해본 결과 811번 우치의 T가 C로 변경되었으며 이에 따른 아미노산은 Phe-258이 Ser-258로 바뀌었다.

Simple and rapid screening methods were developed to screen mutant strains of Trigonopsis variabilis ATCC10679 (TW). D-amino acid oxidase (D-AAO) from a mutant strain, T26, showed about 30% higher specific activity against cephalosporin C than from its wild type, TW. D-AAO genes from both TW and T26 strains were cloned and sequenced. There was one nucleotide changed from T to C at 811 position, resulting in an amino acid codon changed from Phe-258 to Ser-258.